I "biofilms" ritardanu a guariscenza di e ferite EB

Dopu avè lavatu e ferite per caccià i batteri micca attaccati à un biofilm, i tamponi sterili sò stati pressati nantu à una zona di 1 cm² di ferita finu à chì u tissutu trasudava. I pazienti sò stati infurmati chì questu puderia causà discomfort prima di u prucessu è anu datu u so accunsentu in anticipu. Malgradu una manipulazione è una cunservazione attenta di i tamponi, ùn hè statu raccoltu o preparatu abbastanza materiale geneticu cù successu per ottene sequenze genetiche di i batteri chì puderanu esse stati presenti in i biofilm nantu à e ferite. Questu era inaspettatu postu chì u metudu era statu riesciutu prima. I circadori suggerenu chì pruvà di novu implicherebbe anestesia lucale è raschiatura o biopsia di a ferita.

Quattru persone cù DEB è quattru persone cun JEB anu unitu à u prugettu. I campioni sò stati raccolti da ferite chì ùn mostranu micca signu d'infezzione è ùn sò micca stati trattati cù antibiotici recentemente. I campioni sò guardati à -80C finu à ch'elli ponu esse analizati inseme. I risultati seranu spartuti à a fine di stu prughjettu di un annu.

Ricercatore principale:

Dr Josefine Hirschfeld hè prufissore assuciatu è cunsultante onorariu à l'Università di Birmingham Dental School and Hospital. Hè spicializata in odontoiatria restaurativa cun un focus particulari in e malatie di gengive è e cellule immunitarie chjamate neutrofili è u so rolu in e malatie cum'è EB.

Co-ricercatori:

Dr Hadeer Ibrahim hè un assistente di Dermatologia à l'Università di Suez Canal in Egittu è hè stata premiata una borsa di studiu altamente competitiva per finanzà u so PhD in EB à l'Università di Birmingham induve si concentra a so ricerca nantu à migliurà a qualità di vita di i pazienti cù EB di diversi sottotipi.

U Prof Iain Chapple hè Capu di Ricerca per l'Istitutu di Scienze Cliniche, Capu di Periodontologia cù a Scola di Odontoiatria è Consultante Onorariu in Odontoiatria Restaurativa cù Birmingham Community Health Trust.

U Prof Adrian Heagerty hè un Dermatologu Consultant è Prufessore Onorariu di Dermatologia à l'Università di Birmingham cun un interessu particulare in EB. Cunduce parechji gruppi di ricerca attivi è dirige u serviziu EB semi-naziunale in University Hospitals Birmingham NHS Foundation Trust.

Dr Sarah Kuehne hè un docente senior in microbiologia orale è u capu di u Gruppu di Ricerca in Microbiologia Orale in l'Università di Birmingham. U so gruppu di ricerca hà ligami stretti cù l'Istitutu di Microbiologia è Infezzione (IMI) di fama mundiale guidatu da u Prof Ian Henderson.

Collaborazione:

Dr Annika Therese Kroeger, à a Scola di Odontoiatria, Università di Birmingham, hà una vasta sperienza in metagenomica è transcriptomica.

U Prof Moritz Kebschull, à a Scola di Odontoiatria, hà realizatu una ricerca traslazionale premiata chì unisce e caratteristiche cliniche è i fundamenti molecolari di e malatie parodontali è peri-implantari è hè co-investigatore in u Centru di Ricerca Biologica NIHR, recentemente finanziatu.

"Avemu u scopu di cunfirmà a nostra scuperta eccitante iniziale chì i biofilms sò prisenti in ferite EB croniche chì ùn sò micca guariti, mentri ùn sò micca prisenti in ferite più ghjovani. Esploraremu cumu i biofilmi cumuni sò in ferite croniche, i microbi in l'internu, è s'ellu sò diffirenti trà i diversi tipi di EB. Questu hè criticu impurtante perchè i biofilms sò resistenti à i trattamenti antibiotici tradiziunali, è ponu esse un forte mutore di a fallimentu di e ferite croniche per guarì.

Impurtante, i malatii di biofilm, cum'è quelli in a bocca (malattia di a gomma) chì avemu studiatu per più di 20 anni, sò trattati assai diffirenti da infizzioni tradiziunali di ferita. U biofilm stessu deve esse disturbatu fisicamente è ci sò parechje avvicinamenti simplici per ottene questu, secondu a so cumpusizioni. Questi approcci sò digià in usu in altre malatie è puderanu esse adattati assai rapidamente per a cura di e ferite EB, putenzialmente trasfurmendu a gestione di e ferite EB. Questu serà parte di un prughjettu di ricerca più grande chì conducemu, aprendu a strada per più ricerche nantu à cumu tali biofilms interagiscenu cù u sistema immune di u paziente.

In u futuru, applicheremu diverse misure anti-biofilm non invasive, cumprese l'usu di agenti per scumpressà a matrice di biofilm è l'usu di terapia di luce chì serà specifica per i tipi di microbi rilevati.

- Dr Hirschfeld

Titulu di cuncessione: Utilizazione di tecniche analitiche geniche altamente sensibili è specifiche per identificà i microorganismi chì ponu ghjucà un rolu in a cronicità di e ferite EB.

E ferite non curative in i pazienti EB presentanu una morbidità significativa è una qualità di vita più bassa. Cumplicazioni includenu: a necessità di cura di ferita prolungata, prurito, dolore, cancru di a pelle è fusione di dite chì formanu i cosi chjamati "manu mitten".

Avemu capitu cumu è perchè si formanu i blisters EB, ma ùn sapemu micca perchè certi blisters fallenu à guarì per mesi o anni malgradu una bona cura di ferita. Cridemu chì a causa sottostante pò esse a presenza di "biofilms" nantu à a superficia di a ferita.

I biofilms sò aggregati di diversi microbi chì vivenu in una matrice viscosa autoprodutta, chì hè attaccata à una superficia cum'è a pelle è hè spessu resistente à i trattamenti tradiziunali.

I biofilms sò cunnisciuti per disturbà a guariscenza di e ferite è e ferite chì portanu biofilms spessu ùn mostranu micca segni d'infezzione cum'è pus è inflammazioni / rossi. Inoltre, i biofilms ùn ponu micca esse rilevati da i metudi tradiziunali di swabbing di ferita, è ùn rispundenu micca à a cura di ferita regulare è l'usu di antibiotici. In ogni casu, e ferite cù biofilms studiati in altre malatie, cumprese a diabetes, u brusgiatu è e ferite venose, ponu risponde bè à e misure anti-biofilm chì risultanu in guariscenza megliu. A nostra ricerca preliminare utilizendu diverse tecniche di imaging hà dimustratu, per a prima volta, a prisenza di biofilms nantu à ferite croniche di diversi sottotipi EB.

Questa pruposta hà per scopu di cunfirmà i nostri risultati d'osservazione per l'analisi genetica di sti biofilms per revelà i tipi di microbichi prisenti è e pussibuli differenze trà i sottotipi EB.

Questu ùn hè mai statu studiatu, implicarà l'usu di tecniche novi è serà un prughjettu di cullaburazione multidisciplinare. Questu ci aiuterà à sviluppà novi terapii in una manera più mirata, cum'è averemu forti indicazioni per quessa chì e ferite fallenu à guarì. Questu hà da purtà à un accostu più persunalizatu à a terapia, risultatu in strategie di gestione di ferite megliu è aiutanu a guariscenza propria di ferite croniche in i pazienti EB.

Semu in u prucessu di raccolta di campioni. I campioni sò stati raccolti da i pazienti cù EB chì anu ferite aguda / cronica chì ùn mostranu micca signali d'infezzione è ùn sò micca stati trattati cù antibiotici recentemente. Avemu u scopu di raccoglie campioni da 5 pazienti cù EB distroficu (DEB) è almenu 3 cù EB junctional (JEB). A raccolta di campioni da sta cundizione rara di a pelle hè sfida, è i nostri criterii di inclusione / esclusione anu da esse applicati. Tuttavia, finu à avà, avemu riisciutu à recrutà 4 pazienti DEB è 4 JEB. I campioni sò tenuti in un congelatore -80C per u processu dopu una volta chì tutti i campioni sò cullati. (Da u rapportu di prugressu d'aprile 2024.)

E ferite chì ùn guariscenu micca in i pazienti cun EB prisentanu una morbidità significativa è una qualità di vita più bassa. E cumplicazioni includenu: a necessità di cure prolungate per e ferite, pruritu, dolore, cancru di a pelle è fusione di e dite chì formanu e cusì dette "mani à guanto". Capemu cumu è perchè si formanu e vesciche di EB, ma ùn sapemu micca perchè alcune vesciche ùn guariscenu micca per mesi o anni malgradu una bona cura di e ferite. Credemu chì a causa sottostante pò esse a presenza di "biofilm" nantu à a superficia di a ferita.

I biofilm sò aggregati di diversi microbi chì vivenu in una matrice viscida autoprodotta, chì hè attaccata à una superficia cum'è a pelle è hè spessu resistente à i trattamenti tradiziunali. I biofilm sò cunnisciuti per disturbà a guarigione di e ferite è e ferite chì cuntenenu biofilm ùn mostranu spessu segni d'infezzione cum'è pus è infiammazione/rossore. Inoltre, i biofilm ùn ponu esse rilevati da i metudi tradiziunali di tamponamentu di e ferite, è ùn rispondenu micca à a cura regulare di e ferite è à l'usu di antibiotici. Tuttavia, e ferite cù biofilm studiate in altre malatie cumprese u diabete, e ustioni è e ferite venose, ponu risponde bè à e misure anti-biofilm chì risultanu in una migliore guarigione.

Avemu vulsutu cunfirmà a nostra scuperta iniziale eccitante chì i biofilm sò prisenti in e ferite croniche di EB chì ùn guariscenu micca, mentre chì ùn sò micca cusì cumuni in e ferite più ghjovani. Avemu vulsutu esplorà quantu sò cumuni i biofilm in e ferite croniche, i microbi in l'internu, è se questi differenu trà i diversi tipi di EB. Questu hè di primura perchè i biofilm sò resistenti à i trattamenti antibiotici tradiziunali, è ponu esse un forte fattore di u fallimentu di guarigione di e ferite croniche. Impurtantemente, e malatie legate à i biofilm, cum'è quelle in bocca (malattia di e gengive) chì avemu studiatu per più di 20 anni, sò trattate in modu assai diversu da l'infezioni tradiziunali di e ferite. U biofilm stessu deve esse fisicamente disturbatu è ci sò parechji approcci simplici per ottene questu, secondu a so cumpusizione. Quessi approcci sò digià in usu in altre malatie è puderanu esse adattati assai rapidamente per a cura di e ferite di EB, trasfurmendu potenzialmente a gestione di e ferite di EB. Questu face parte di un prughjettu di ricerca più largu chì stemu cunducendu, aprendu a strada à ulteriori ricerche nantu à cumu tali biofilm interagiscenu cù u sistema immunitariu di u paziente.

E persone cun EB chì si sò presentate à l'uspidale dentale di Solihull è Birmingham, Birmingham, UK cum'è parte di a so cura medica regulare sò state reclutate. I pazienti reclutati sò stati selezziunati cù i seguenti criteri: avè più di 18 anni senza altre cundizioni mediche croniche, micca immunocompromessi è ùn riceve micca antibiotici topichi o sistemichi per almenu 2 settimane prima di a raccolta di u campione è chì anu ferite chì ùn mostranu segni d'infezzione, per esempiu pus, rossore o inflammazione cù una durata di menu di 3 mesi chì s'assumiglia à ferite croniche o menu di 2 settimane chì s'assumiglia à quelle acute cum'è cuntrollu. Dopu avè ottenutu cunsensi scritti informati per l'approvazione etica di u studiu, e ferite sò state irrigate cù soluzione salina sterile per sbarrazzassi di i batteri flottanti. Dopu, un tampone sterile hè statu utilizatu per ottene un campione di a superficia di a ferita attraversu u campionamentu di una zona di 1 cm2 cù pressione finu à chì u tissutu trasuda. I pazienti sò stati avvertiti in anticipu chì questu puderia causà disagiu. Tuttavia, questu era impurtante per ottene un campione rappresentativu. U tampone hè statu poi piazzatu in un tubu sterile cù un liquidu chì cunserva u materiale geneticu, trasmessu in un mezu fretu di ghiaccio secco è trasportatu à u laburatoriu u stessu ghjornu per esse cunservatu in un congelatore à -80 ° C finu à un processu successivu. Per u trattamentu di i campioni, i tamponi sò stati scongelati gradualmente, preparati per l'estrazione di l'ARN utilizendu un kit secondu u protocolu di u fabricatore. L'ARN estrattu hè statu dopu mandatu per l'analisi è a preparazione di a biblioteca à una sucietà chì ùn hè micca riescita à ottene dati da questu per via di a piccula quantità di cellule è di u materiale geneticu chì cunteneva raccoltu cù u nostru metudu di campionamentu di ferite non invasivu. I campioni sò stati poi recuperati è mandati à una sucietà diversa dopu avè avutu una longa discussione cù i so esperti nantu à a natura di i nostri campioni. Sfurtunatamente, a seconda sucietà ùn hà pussutu ottene dati mancu.

Stu risultatu era imprevisu postu chì i kit è l'arnesi di raccolta di campioni utilizati sò stati utilizati per ottene tali dati è a nostra squadra hà una bona sperienza in u so usu, ottenuta attraversu prughjetti simili precedenti per l'estrazione di RNA. Inoltre, metudi simili per a raccolta di dati nantu à u microbioma di e ferite sò stati utilizati da altri circadori. Per purtà sta quistione di ricerca avanti per a ricerca futura, si cunsiglianu biopsie di ferite o raschiamenti attenti di ferite invece di tamponi di ferite cum'è alternativa per a raccolta di campioni di superficie di a ferita. Questu pò richiede una qualchì forma di anestesia lucale per rende sta prucedura più comoda per e persone affette da EB. A quistione di studiu è l'ipotesi sò sempre valide è ghjunghje à un risultatu seria beneficu per riorientà u modu in cui vedemu e ferite EB è adattà un pianu di gestione adattatu chì puderia accelerà u prucessu di guarigione, minimizà a cronicità di e ferite cù i so sintomi assuciati di dolore, prurito è cumplicazioni à longu andà cum'è cicatrice, cuntrattura, deformità è cancru di a pelle. (Da u rapportu finale 2025.)