Migliurà a consegna di a terapia genica RDEB
A consegna virali mejorata di a terapia genica à a pelle RDEB puderia purtà à un cuntrollu di sintomi più durabile è più efficace cù menu effetti secundari.
Dr Ángeles Mencía travaglia in CIEMAT in Madrid, Spagna, in stu prughjettu per migliurà l'opzioni per furnisce a terapia genica direttamente à e ferite RDEB. I metudi di terapia genica attuale implicanu un virus alteratu standard applicatu direttamente à a ferita cum'è un gel. Stu prughjettu hà u scopu di utilizà un virus diversu per furnisce i geni di collagene chì funzionanu, inizialmente in cellule di a pelle cultivate da una persona cù RDEB. Stu tipu di virus hà una capacità naturale di furnisce i geni specificamente in e cellule di a pelle è hè previstu di esse più efficaci, causanu menu effetti secundari è esse più faciuli di fabricà. Inoltre, serà testatu per l'usu in l'editazione di u gene CRISPR / Cas9 per correggerà una parte rotta di u genu RDEB per chì a proteina di collagene di travagliu pò esse fatta da u genu di una persona.
Circa u nostru finanziamentu
Leader di ricerca | Dr Ángeles Mencía |
Instituzione | CIEMAT, Spagna |
Tipi di EB | RDEB |
A implicazione di u pazientu | Innò |
A quantità di finanziamentu | £15,000 |
A durata di u prugettu | annu 1 |
Data d 'inizione | 1 ghjennaghju 2024 |
ID internu DEBRA | GR000043 |
Dettagli di u prugettu
In questu prughjettu, i circadori anu creatu metudi di terapia genica per rimpiazzà u genu RDEB rottu (collagene-7) in e cellule di i pazienti in u laburatoriu, è per furnisce trattamenti di mudificazione genetica direttamente in e cellule di una persona. Siccomu parechje persone sò state infettate da virus umani è puderanu avè una risposta immune chì riducerebbe l'efficacità di a terapia genica cù virus umani, u novu sistema usa un virus di porcu. Hè ancu menu prubabile di causà effetti secundarii perchè divide u virus in duie parti, un vettore "amplicone", chì cuntene a terapia genica ma micca geni virali, è un virus "helper" chì ùn pò micca riproduce si ma aiuta à creà a terapia genica.
U novu sistema virale pò aghjunghje una nova ricetta di Collagen-7 funzionale in e cellule di a pelle di u paziente, è ancu aghjunghje l'arnesi di edizione genetica per curregge un cambiamentu geneticu in e cellule di a pelle di u paziente. U primu puderia aiutà temporaneamente a pelle RDEB à stà megliu inseme, è u secondu puderia purtà à un miglioramentu à longu andà.
U prossimu passu serà di testà queste opzioni di terapia genica in mudelli di pelle prima ch'elli possinu esse sviluppati in trattamenti per a pelle chì offrenu sia una guarigione di e ferite più efficace sia una currezzione à longu andà di u cambiamentu geneticu sottostante.
I ricercatori anu utilizatu cellule cultivate in u laboratoriu per cumincià à fà a so nova terapia genica.
U so scopu hè di pudè fà a terapia genica più efficace è in quantità più grande, è informanu chì i so esperimenti iniziali mostranu chì questu hè pussibule.
Ricercatore principale:
Dr Ángeles Mencía hà più di 20 anni di sperienza in a diagnosi moleculare di e malatie rare, participendu à u disignu, validazione è traduzzione di strumenti di diagnostichi basati nantu à a sequenza di a prossima generazione, cumprese pannelli per a diagnosi di epidermolisi bullosa. Hà una vasta sperienza in u sviluppu di strumenti molecolari per l'edizione di geni chì sò trasferiti à a clinica.
Co-ricercatori:
Dr Silvia Gómez-Sebastián hè prufissore assuciatu à a facultà di Medicina, Università Autonoma di Madrid. Hà più di 20 anni di sperienza in a manipulazione genetica di virus, travagliendu cù l'herpesvirus durante i so primi anni di ricerca. Hà travagliatu cù vettori ampliconi HSV-1 chì portanu u locu FRDA cumpletu, per ripristinà a frataxin (FA) in cellule di pazienti di Friedreich Ataxia.
Dr Rodolfo Murillas hè un scientist senior in CIEMAT cù una vasta sperienza in u campu di a biologia di a pelle, cumprese a transgenesi epidermica, u sviluppu di vettori virali per a terapia genica di a pelle, è u sviluppu di protokolli sperimentali per a correzione di l'epidermolisi bullosa distrofica per via di geni. edizione.
Dr Mirentxu Santos hè un scienziatu senior in CIEMAT cù una vasta esperienza in i culturi di cellule, i culturi primari, a biologia moleculare è cellulare, u ciclu cellulare è e vie di signalazione.
Dr Marta García hè Prufessore di Ingegneria Tissuale in l'Università Carlos III di Madrid UC3M. U Dr García hà un interessu longu in u studiu moleculare di a genodermatosi è hè un espertu ricunnisciutu in u sviluppu di mudelli di pelle umanizzata per e malatie dermatologiche rare.
Diana de Prado hè una Studiente Laureata chì travaglia in u so PhD sottu a tutela di i Dottori Mencia è Murillas, principiendu in u 2023.
"L'avanzati in e terapie geniche per RDEB in l'ultimi anni ci permettenu di prevede trattamenti chì sò efficaci è simplici per amministrà u topicu, ma cù u putenziale di migliurà significativamente a vita di i pazienti.
L'editazione di geni riesciuta cù questi vettori apre a pussibilità di trattà altri tipi di EB, cum'è EBS dominanti o EBD, cù strumenti CRISPR/Cas specifichi per alleli per eliminà l'espressione di alleli patogeni.
– Dr Ángeles Mencía
Titulu di cuncessione: Piattaforma nova per a generazione di vettori basati in Herpesvirus Pseudorabies più sicuri per a terapia RDEB.
A terapia genica hè apparsu cum'è un trattamentu curativu potenziale per l'EB distroficu recessivu (RDEB) attraversu diverse strategie per correggerà e mutazioni. I vettori virali sò strumenti di labburatoriu chì sò usati per trasportà ciò chì hè necessariu per correggere mutazioni o per trasportà geni sani chì aiutanu à restaurà a proteina affettata. Questi strumenti di labburatoriu sò generalmente da diversi virus, cum'è l'adenovirus o l'herpes virus.
In precedenza, u nostru gruppu hà dimustratu chì i vettori derivati da l'adenovirus sò utili per ristabilisce u Collagen VII è ristabilisce l'aderenza trà a dermis è l'epidermisa in vivo. Inoltre, novi avanzati in u disignu di i vettori virali permettenu u prugressu versu un trattamentu più estensivu è efficace di a pelle RDEB. I vettori derivati da u virus di l'herpes anu un grande potenziale per a terapia genica EB data a so capacità naturale di infettà a pelle. Un prucessu clinicu recente hà utilizatu un vettore di virus herpes simplex (HSV-1) per furnisce una versione funzionale di u genu COL7A1 in ferite di e persone cun RDEB. I risultati dimustranu una mellura significativa in a cicatrisazione di ferite è una resistenza aumentata à i vesciche. Questi risultati promettenti cunfirmanu u putenziale di i vettori derivati da l'herpesvirus per a terapia RDEB.
In questu sensu, a nostra squadra hè sviluppata una nova piattaforma vettoriali basata nantu à u virus di pseudorabia porcina (famiglia Herpesviridae), chì hà qualchì vantaghju annantu à l'HSV-1, postu chì hè più sicura è più faciule da pruduce in quantità maiò. Basatu nantu à sta nova piattaforma, prupunemu di generà vettori per RDEB, paragunabili à quelli chì sò attualmente pruvati in prucessi clinichi, cù u putenziale di correzione più durabile dopu l'applicazione topica.
A nostra squadra hà travagliatu duramente per sviluppà trattamenti efficaci è faciuli d'amministrari chì puderanu rivoluzionari l'approcciu à u trattamentu RDEB. A cuntrariu di i metudi tradiziunali di a terapia di l'injertu di geni chì implicanu prucessi chirurgici invasivi è dolorosi, u nostru approcciu hè focu annantu à e terapie geniche d'attualità destinate à migliurà a guariscenza di ferite croniche è lesioni chì ùn ponu esse trattate cù injerti di pelle. U nostru labburatoriu hà iniziatu u sviluppu di strumenti di editazione di geni molecolari per a correzione di mutazioni RDEB cù u putenziale di ottene migliure durevule. Ricertamenti, avemu restauratu bè u Collagen VII è l'aderenza trà dermis è epidermis in mudelli preclinici.
Attualmente sviluppemu novi tipi di vettori per questu scopu, in particulare quelli derivati da virus simili à l'herpes, chì anu una forte capacità naturale di infettà a pelle è, per quessa, puderia esse assai efficace in u trattamentu di ferite croniche in e persone cù RDEB. I risultati promettenti di prucessi clinichi recenti in i Stati Uniti basati nantu à approcci simili à quellu chì prupunemu ci dà a fiducia chì andemu in a direzione ghjusta. Questa linea di ricerca rapprisenta una grande opportunità per avanzà u trattamentu di RDEB, è simu impegnati à cuntinuà u nostru travagliu cù entusiasmu è rigore.
U nostru scopu hè di purtà speranza à quelli chì soffrenu di sta malatia è migliurà a so qualità di vita. Inseme, pudemu avanzà versu un futuru più luminoso è più promettente per quelli chì cumbattenu RDEB.
I vettori novi derivati da l'herpesvirus anu una grande prumessa per u trattamentu di l'epidermolisi, chì offre una cura potenziale per questa cundizione debilitante di a pelle. Per questi trattamenti per esse viable per l'usu clinicu, hè cruciale di pruduce sti vettori in quantità maiò. I vettori Amplicon, una sottoclasse di vettori derivati da l'herpes, presentanu una alternativa più sicura perchè ùn mancanu di geni virali. In ogni casu, u so prucessu di produzzione hè cumplicatu da a necessità di coproduzzione cù virus herpes helper.
U nostru prughjettu prupone una piattaforma di pruduzzione innovativa pensata per rinfurzà u rendiment di vettori terapeutichi, ottimizendu cusì a qualità di e preparazione finali. In a fase iniziale, avemu mudificatu e cellule di pruduttori PK15 per pruducia preferenzialmente u vettore desideratu eliminendu virus helper. Stu approcciu hà cambiatu cù successu u rapportu di vettore / aiutu in favore di u vettore terapeuticu, serve com'è prova di cuncettu per questa strategia di produzzione è dimustrà l'efficacità di u nostru disignu. Avanzate, selezziunemu cloni di cellule specifichi per raffinà ulteriormente è rinfurzà a piattaforma di produzzione. Una pupulazione clonale hè anticipata per migliurà significativamente l'inattivazione di i vettori di l'aiutu, aumentandu cusì l'output di vettori terapeutichi.
Stu travagliu, resu pussibule da u generoso finanziamentu di DEBRA UK, ùn hè micca solu un avanzamentu significativu in a produzzione di vettori, ma ancu un passu criticu versu u sviluppu di opzioni terapeutiche avanzate. Offre speranza è un futuru più brillanti per i pazienti chì soffrenu di epidermolisi, annunciendu novi trattamenti è una qualità di vita mejorata. Da u rapportu di prugressu 2024.
U nostru prugettu studia un sistema vettoriale di herpesvirus cuncipitu per risponde à i bisogni terapeutici sia transitori sia permanenti in l'epidermolisi bollosa (EB). U sviluppu di trattamenti topichi per e lesioni è e ferite croniche subite da i pazienti cun EB hè avà pussibule grazia à i progressi in a ricerca preclinica. Quessi progressi sò stati fatti nantu à dui fronti: a biologia moleculare è a terapia genica.
U primu avanzamentu hè u sviluppu di strumenti genetichi per curregge e mutazioni genetiche di a malatia aduprendu a tecnulugia di edizione genetica. U nostru travagliu ci hà permessu di adattà u più versatile di i strumenti di edizione genetica, u sistema CRISPR, per curregge e cellule di i pazienti cun una mutazione assai prevalente in l'exone 80 di u genu COL7A1 è per assicurà chì e cellule trattate cù CRISPR restauranu a pruduzzione di Collagene VII (C7) è l'adesione trà u derma è l'epidermide.
U secondu avanzamentu riguarda i veiculi utilizati per furnisce l'arnesi currettivi à a pelle di i pazienti. In l'ultimi anni, i testi clinichi anu dimustratu u putenziale di i vettori derivati da i virus di l'herpes per mudificà geneticamente e cellule di a pelle quandu sò applicati topicamente in forma di crema. Quessi vettori, digià appruvati per l'usu clinicu da a FDA è l'EMA, permettenu a restaurazione temporanea di l'espressione di C7 in l'area applicata di e lesioni cutanee in i pazienti cun EB, facilitendu a guarigione di e ferite. U novu vettore di herpesvirus sviluppatu quì replica sta consegna transitoria di proteine, chì hà u putenziale di permette una rapida guarigione di e ferite. Inoltre, l'integrazione di a capacità di edizione di u genu CRISPR permette à a stessa piattaforma vettoriale di avè u putenziale per un trattamentu di riparazione durevule in i pazienti chì portanu mutazioni in u duminiu collagenu.
In questu prughjettu avemu custruitu i dui tipi di vettori è li avemu prudutti nantu à una nova piattaforma di vettori herpes, derivata da un virus herpes chì affetta naturalmente i porchi (u virus di a pseudorabia porcina). Questa piattaforma hè una alternativa à quella sviluppata in l'herpes simplex, cù potenziali vantaghji. U primu hè l'assenza d'immunità à questu vettore in l'omu, chì faciliterebbe u trattamentu. U secondu hè u cuncepimentu in forma di un vettore senza geni virali, ciò chì hè chjamatu un vettore "amplicone", chì hè vantaghjosu in termini di minore tossicità, immunogenicità è livelli migliorati di espressione vettoriale. U sviluppu di un cuncepimentu di amplicone per questu vettore herpesvirale richiede mudificazioni à u sistema per pruduce quantità utili di vettori cù u menu virus accumpagnatore non replicante pussibule (chjamatu virus helper). Questa piattaforma autoinattivante hè stata cumpletata cù successu.
Avemu sviluppatu un sistema cumpletu per a pruduzzione di vettori d'ampliconi di u virus di l'herpes di a pseudorabia, cumprese cellule chì agiscenu cum'è produttori di virus, ampliconi incapsulati in contenitori herpesvirali, è un virus helper mudificatu cuncipitu per impedisce a so propria replicazione in e cellule. Stu sistema rapprisenta un avanzamentu significativu in a tecnulugia di a terapia genica, affrontendu efficacemente e sfide chjave in a pruduzzione di vettori. Avemu utilizatu a nova piattaforma per generà un vettore per a ricuperazione di C7 per addizione (cù u putenziale di trattà qualsiasi paziente RDEB per a ricuperazione temporanea di l'adesione derma-epidermide) è un altru vettore per a ricuperazione di C7 per edizione (cù u putenziale di trattà i pazienti chì portanu una mutazione à alta prevalenza in l'exone 80 per a ricuperazione di l'adesione à longu andà). Avemu testatu i dui vettori è dimustratu a so funzionalità in una linea di cheratinociti derivata da un paziente chì porta una mutazione di l'exone 80. Ci vole più travagliu per dettaglià i protokolli di pruduzzione finu à chì pudemu pruduce quantità utili di vettori cù a minima contaminazione pussibule da u vettore helper, ma a piattaforma s'hè dimustrata funzionale è pensemu chì u so sviluppu hà un grande putenziale per pruduce novi vettori herpesvirali per trattà micca solu RDEB ma ancu altre forme di genodermatosi assuciate à altri geni.
U prossimu passu serà di testà ste produzioni vettoriali in mudelli preclinichi in vivo, cum'è quelli chì avemu in u nostru laburatoriu aduprendu a pelle di i pazienti rigenerata in mudelli immunodeficienti è un mudellu di RDEB. U sviluppu di sta nova piattaforma vettoriale apre nuove pussibilità micca solu per u trattamentu di l'EB distrofica recessiva, ma ancu per affrontà altre cundizioni genetiche chì implicanu disordini di a pelle. Cumbinendu l'editazione di u genu CRISPR cù sistemi avanzati di consegna virale, u nostru scopu hè di furnisce à i pazienti EB prudutti topichi chì offrenu sia a guarigione immediata di e ferite sia a currezzione à longu andà di u difettu geneticu sottostante. Credemu chì questu approcciu hà u putenziale di trasfurmà u paisaghju di trattamentu per l'EB è malatie simili. (Da u rapportu di prugressu finale 2025.)