Scarring in RDEB (2023)

Nirogacestat, una droga recentemente appruvata in i Stati Uniti per trattà un tipu di crescita benigna (tumori desmoidi) senza relazione cù EB, hè stata pruvata. Hà fattu e cellule di a pelle cultivate in u laboratoriu da e persone cun RDEB più sane è ponu esse ripurtate per riduce i sintomi per e persone chì vivenu cù EB.

I ricercatori anu publicatu i so risultati in u Journal of Investigative Dermatology in 2024 è anu sottumessu una dumanda di patente intitulata "Inibitori di gamma-secretase per l'usu in u trattamentu di l'epidermolisi bullosa".

E cellule di a pelle (fibroblasti) da e persone cun RDEB sò cultivate in u laboratoriu è i livelli è i tipi di molécule chjamati microRNA chì producenu sò investigati. U rolu di sti molécule in u cuntrollu di cicatrici (fibrosi) pò fà i mira di e terapie EB. Quattru molécule di microRNA sò stati scelti per più studiu perchè sò prisenti à livelli assai più alti (trè di i quattru) o più bassi in cellule di e persone cun RDEB. Hè statu dimustratu per affettà i prucessi di fibrosi è inflammazioni.

Separatamente, una droga sviluppata per trattà i cancers hè stata dimustrata per esse una terapia potenziale per a riduzione di cicatrici in RDEB.

Questa infografica, furnita da u ricercatore in u 2022, illustra u travagliu in corso:

Le Prof Giovanna Zambruno (à droite) avec le Dr Angelo Giuseppe Condorelli dans la salle de culture cellulaire de l'hôpital pour enfants Bambino Gesù. U duttore Condorelli hè u ricercatore post-doctorale incaricatu di u prugettu in ogni ghjornu in u laboratoriu.

Capu di ricerca:

Dr Giovanna Zambruno, Consultant, Bambino Gesù Children's Hospital, IRCCS, Rome, Italy

U Dottore Zambruno hè laureata in Medicina à l'Università di Pavia, Italia (1982) è hà finitu a so furmazione di residenza in Dermatologia è Venereologia in u 1985 in a stessa Università. Dopu una borsa di ricerca à u Laboratoriu di Ricerca Dermatologica è Immunologica INSERM è à u Dipartimentu di Dermatologia di l'Università Claude Bernard, Lione, Francia (1985-1986), hè diventata membru di u staffu di u Dipartimentu di Dermatologia, Università di Modena, induve hà stabilitu. u so primu gruppu di ricerca. En 1995, elle a déménagé à l'Istituto Dermopatico dell'Immacolata (IDI), où elle a été Directrice du Laboratoire de Biologie Moléculaire et Cellulaire (1995-2015) puis Directrice Scientifique (2017-2018). Attualmente hè consultante à l'Hospital Bambino Gesù di Roma, induve collabora cù l'Unità di Patologia è Dermatologia è a Divisione di Ricerca di Genetica è Malattie Rare. In l'ultimi 25 anni, a so attività clinica è di ricerca hè stata cuncentrata nantu à e malatie rare di a pelle, in particulare l'epidermolisi bullosa ereditata. Hè autore di più di 270 publicazioni in riviste peer-reviewed, 80 di e quali nantu à epidermolysis bullosa.

Co-investigatori:

Dr Teresa Odorisio, Laboratoire de Biologie Moléculaire et Cellulaire, IDI-IRCCS, Rome, Italie
Collaboratore: Prufissore Leena Bruckner-Tuderman, Universitätsklinikum Freiburg - Hautklinik, Germania

"A fibrosi guidata da ferite è inflammazioni hè una caratteristica constante è progressiva in RDEB. Hè rispunsevuli di a furmazione di a manu mitten, contractures di i membri è strinze di mucosa, è hè implicatu in u sviluppu di carcinoma squamous cell squamous precoce è aggressivu di a pelle. A lotta contru a fibrosi rapprisenta una strategia per migliurà u cursu di a malatia è a qualità di vita di i pazienti. Per a prima volta, i nostri analisi investigaranu i livelli di espressione di un gran numaru di miRNA è u so rolu funziunale in a fibrosi RDEB. L'analisi di miRNA serà u puntu di partenza per identificà è sbulicà novi obiettivi / percorsi farmacologici per future strategie terapeutiche anti-fibrotiche innovative.

– Dr Giovanna Zambruno

Titulu di Grant: MicroRNAs in distrophic epidermolysis bullosa fibrosis: expression profileing, activity and therapeutic perspectives

U nostru DNA hè custituitu di geni chì almacenanu l'infurmazioni per custruisce e proteine ​​​​chì formanu u nostru corpu. L'istruzzioni di l'ADN sò trascritte in molécule di RNA chjamate RNA messageri (mRNA), chì servenu per pruduce sti proteini (traduzzione). In ogni casu, certi RNA, chjamati RNA non codificanti, ùn sò micca tradutti in proteini, ma regulanu a quantità di prutezione prodotta. I microRNA (miRNA) sò RNA non codificanti chì bloccanu a produzzione di prutezione interagisce cù mRNA specifichi. I MiRNA sò regulatori chjave di tutti i prucessi biològichi è a so funzione anormale cuntribuisce à parechje malatie, cumprese i disordini di a pelle fibrotica (cicatrice).

In l'epidermolisi bullosa distròfica recessiva (RDEB) una vesciche incessive porta à una fibrosi severa chì ghjoca un rolu impurtante in u sviluppu di e cumplicazioni più gravi di a malatia. U nostru gruppu hà osservatu chì certi miRNA sò più abbundanti in fibroblasti da i pazienti RDEB (RDEBF) è esercitanu una attività pro-fibrotica in vitro. Basatu nantu à questi studii preliminari, u prughjettu attuale hà per scopu di identificà miRNA supplementari disregulati in RDEBFs è di caratterizà u so rolu in i prucessi fibrotici chjave cum'è a produzzione è a liberazione di molecule pro-fibrotiche impurtanti (per esempiu, u fattore di crescita trasformante-b1) è a dermica. (pelle) irrigidimentu. Stu studiu cuntribuisce à espansione a cunniscenza nantu à i patomecanismi di e malatie è à identificà novi miRNA è miri di miRNA cum'è target potenziali per terapie innovative per limità a fibrosi.

U nostru DNA hè custituitu di geni chì almacenanu l'infurmazioni per custruisce e prutezione chì formanu u nostru corpu. L'istruzzioni di l'ADN sò trascritte in molécule di RNA chjamate RNA messageri (mRNA), chì servenu per pruduce proteine. In ogni casu, una famiglia di picculi RNA, chjamati microRNAs, ùn diventanu micca proteine ​​​​ma regulanu a quantità di prutezione prodotta. I microRNA bloccanu a produzzione di proteine ​​​​interagendu cù mRNA specifichi, definiti cum'è miri microRNA. I microRNA sò regulatori chjave di tutti i prucessi biologichi è u so malfunzionamentu cuntribuisce à parechje malatie, cumprese l'epidermolisi bullosa distrofica recessiva (RDEB) è e so cumplicazioni cliniche severi, cum'è a inflamazioni di a pelle, a fibrosi è u sviluppu di u cancer.

In i tessuti fibrotici, i fibroblasti pruducianu quantità eccessivi di proteini "fibrotichi", principarmenti collageni, chì sò dipositati fora di e cellule, è mostranu una capacità aumentata di cuntrarà u tissutu intornu à elli, purtendu à a rigidità è a disfunzione di i tessuti. U nostru studiu precedente hà dimustratu chì un microRNA chjamatu miR-145-5p, hè più abbundante in fibroblasti da i pazienti RDEB è hà dimustratu u so rolu in i prucessi fibrotici. In questu prughjettu avemu evaluatu l'abbundanza di centinaie di microRNA à una volta è cuminciamu à spiegà e so funzioni. Avemu identificatu un gruppu di 36 microRNAs deregulati in fibroblasti RDEB (vale à dì molécule almenu duie volte più o menu abbundanti in quantu à e cellule di donatori sani). Dopu, avemu sceltu per più investigazioni quattru microRNA, prisenti in quantità aumentata o ridotta in cellule RDEB in paragunà à i cuntrolli. Avemu osservatu chì a modulazione farmacologica di questi microRNA hè capaci di cuntrastà a produzzione di proteine ​​​​fibrutiche tipiche da i fibroblasti RDEB.

In parallelu, avemu approfonditu i nostri studii nantu à un mecanismu moleculare recentemente identificatu implicatu in a fibrosi RDEB, chjamatu Notch pathway. Una via cellulare hè custituita da una seria ben organizata d'azzioni guidata da molécule specifiche (chjamate membri di a via), chì causanu diversi avvenimenti biologichi, cum'è a divisione cellulare, u muvimentu o a fibrosi. I nostri studii anu revelatu chì l'inibizione di a via Notch da diversi approcci, cumprese droghe dispunibili in u cummerciu, ma finu à a data aduprate per trattà e malatie diverse da RDEB, attenua marcatamente parechji tratti pro-fibrotichi in e cellule RDEB. In dettaglio, i fibroblasti RDEB trattati cù molécule specifiche chì riducenu l'attività di Notch presentanu una capacità ridotta i) di cuntrarà gel di collagene (chì rapprisentanu un mudellu di a capacità di i fibroblasti di riduce u tissutu circundante), ii) di deposità proteine ​​​​"fibruse". (collagens) fora di a cellula, iii) per secrete a molècula fibrotica più impurtante, vale à dì u factor di crescita di trasfurmazioni beta1, iv) per spustà è proliferate, è (v) per pruduce una larga gamma di molécule chì sò tipicamente abbundanti in tissuti fibrotici. Inseme, i nostri dati supportanu a rilevanza biologica di a via Notch in i prucessi di malatie RDEB, è a so inibizione cum'è un scopu terapeuticu innovativu per contru à a fibrosi di a pelle. (Da u rapportu di prugressu 2022).

U nostru materiale geneticu (sequenze di DNA è RNA) almacene è trasmette l'infurmazioni per furmà tutti i cumpunenti di u corpu, cumprese proteine ​​​​è enzimi, è per rializà ogni prucessu vitale. A quantità è l'attività propria di ogni molécula biologica hè cruciale per assicurà a funziunalità di i tessuti è l'urgani è, cusì, per mantene a salute. In particulare, l'abbundanza di prutezione hè cuntrullata da diversi miccanismi genetichi, cumprese l'azzione di microRNAs - una famiglia larga (> 2500 membri) di molécule di RNA curtite cù roli regulatori.

I microRNA fermanu a produzzione di proteine ​​​​inibendu a "transizione" di i mudelli di proteine ​​​​, chjamati RNA messageri (mRNA), in proteini. Ogni microRNA modula un inseme specificu di mRNAs / proteini, definiti cum'è miri di microRNA in una manera dipendente da a cellula è u cuntestu. U malfunzionamentu di i MicroRNAs cuntribuisce à una varietà di malatie, cumpresa a forma distrofica recesiva di epidermolisi bullosa (RDEB) è e so cumplicazioni cliniche severi, cum'è inflammazioni, fibrosi è u sviluppu di u cancer.

In i tissuti fibrotichi, i principali cellule dermal-residents, chjamati fibroblasti, pruducianu quantità eccessivi di proteini "fibrous" deleterious è molécule "pro-fibrotic", chì cuntribuiscenu à a rigidità di a pelle è a disfunzione di fibroblasti.

In questu studiu, avemu identificatu è investigatu a funzione biologica di dui microRNA, miR-129-1-3p è miR-210-3p, truvati disregulati in fibroblasti ottenuti da i pazienti cù RDEB (RDEB-FB). In particulare, a quantità di miR-210-3p hè stata aumentata in RDEB-FB mentre miR-129-1-3p hè stata ridutta in paragunà à e cellule di donatori sani. In RDEB-FB, l'inibizione farmacologica di miR-210-3p da una molecula definita "anti-miR" hà riduciutu l'abilità di i RDEB-FB di muvimenti, a chjamata "rata di migrazione", è di sintetizà proteine ​​​​pro-fibrotiche. , cumpresu un gruppu di molécule implicati in a risposta cellulare à u dannu induvatu da u stress oxidativu. In un altru settore di esperimenti, l'aumentu di i livelli di miR-129-1-3p da una molecula definita "mimica" (miR-129-1-3p-mimic) diminuì a contractilità cellulare - un segnu di i fibroblasti pro-fibrotici - è ridutta. l'espressione di una selezzione di proteini pro-fibrotic. Questi risultati indicanu u rolu anti-fibroticu di miR-129-1-3p è, à u turnu, l'impattu preghjudiziu di a so regulazione in i fibroblasti di i pazienti.

In seguitu, avemu identificatu è validatu una nova proteina pro-fibrotica regulata da miR-129-1-3p, chì significa chì i bassi livelli di miR-129-1-3p (cum'è avemu osservatu in fibroblasti RDEB) currispondenu à livelli più alti di stu novu miR. -129-1-3p mira moleculare.

In parallelu, avemu finalizatu un studiu chì descrive u rolu pro-fibroticu di i membri di a via NOTCH in a fibrosi RDEB. In dettaglio, i nostri scuperti ottenuti in fibroblasti da i pazienti cù RDEB anu revelatu chì l'inibizione di a cascata di signalazione NOTCH da PF-03084014 (nirogacestat), una molécula di a famiglia di inhibitori di gamma-secretase, attenua marcatamente diverse caratteristiche fibrotiche chì varienu da a deposizione di collagene à u secrezione di u fattore chì induce a fibrosi TGF-ß1 è a produzzione di proteine ​​​​pro-fibrotiche. Da nutà, PF-03084014 hè statu recentemente appruvatu da a FDA per u trattamentu di tumuri desmoidi è cummercializatu cum'è OgsiveoTM da SpringWorks Therapeutics Inc. In u futuru, sta droga puderia esse sfruttata in modu efficiente per a so repurposing per l'usu com'è agenti anti-fibroticu in RDEB. In cunclusione, i nostri dati sustenenu fermamente a rilevanza biologica di a via NOTCH in i prucessi di malatie ligati à RDEB, è a so inibizione da molecule specifiche cum'è una strategia terapeutica innovativa per contru à a fibrosi di a pelle in RDEB. (Da u rapportu finale di u 2024).